高效液相色譜儀的日常維護(hù)    

2.1高效液相色譜儀器的開機(jī)、關(guān)機(jī)注意事項(xiàng)。  

一切分析準(zhǔn)備工作做好后，依次按順序打開穩(wěn)壓電源、高壓輸液泵、柱溫箱、檢測器，待以上各部件自檢結(jié)束后，打開連接儀器的電腦，啟動(dòng)工作軟件。  

儀器分析工作結(jié)束后，關(guān)閉工作軟件，再依次按順序關(guān)閉檢測器、柱溫箱、高壓輸液泵。 

2.2對流動(dòng)相的要求  

液相色譜所用的流動(dòng)相一般為低沸點(diǎn)有機(jī)溶劑與水或者緩沖溶液的混合物。為**液相色譜儀器的正常使用，所有流動(dòng)相必須是色譜級的，且經(jīng)過過濾雜質(zhì)、排除氣泡后裝入干凈的流動(dòng)相貯存瓶中待用。  

2.2.1流動(dòng)相的物理性能要求  

       對分析物要有足夠的溶解能力，以利于提高檢驗(yàn)的靈敏度；流動(dòng)相的黏度要小，以**合適的柱降壓；流動(dòng)相的沸點(diǎn)要低，以利于制備分離時(shí)樣品的回收；  

2.2.2流動(dòng)相的溫度  

       一般以硅膠為基質(zhì)的色譜柱較高使用溫度不**過60℃，以低于40℃為宜。溫度過高會(huì)加速鍵合相水解和硅膠的溶解，從而使填料性質(zhì)改變，柱塌陷，降低柱效。較低使用溫度不**過0℃。  

2.2.3流動(dòng)相的過濾  

       所有流動(dòng)相在使用前都必須經(jīng)過0.45μm（或0.22μm）的有機(jī)相/脂溶性和水相（水溶性）濾膜過濾，以除去雜質(zhì)微粒。 

2.2.4流動(dòng)相的脫氣  

       液相色譜所用到的流動(dòng)相必須預(yù)先脫氣，否則容易在系統(tǒng)內(nèi)產(chǎn)生氣泡，影響泵的工作， 影響基線的穩(wěn)定性。此外，溶解在流動(dòng)相中的氧還可能與樣品、流動(dòng)相反應(yīng)。溶解氧能與某些有機(jī)溶劑（如甲醛、四氫呋喃）形成有紫外吸收的絡(luò)合物，提高背景吸收，會(huì)在梯度洗脫時(shí)造成基線漂移或形成鬼峰。  

常有的脫氣方法有以下四種： 

（1） 在線真空脫氣法   把真空脫氣裝置串聯(lián)到儲(chǔ)液系統(tǒng)中，并結(jié)合膜過濾器，使流動(dòng)相在進(jìn)入輸液泵前脫氣，此法效果較好，尤其適用于多元溶劑體系。  

（2） 超聲波脫氣法  此法是實(shí)驗(yàn)室較常用的一種方法，將配置好的流動(dòng)相連同容器一起放入超聲波水浴中超聲15至30分鐘。  

（3） 抽真空脫氣法  使用微型真空泵，降壓至0.05～0.07MPa即可出去溶解的氣體。由于抽真空會(huì)引起混合溶劑組成的變化，故對于多元溶劑體系應(yīng)該先預(yù)先脫氣后再進(jìn)行混合，以**混合后的組分不變。  

2.3泵的維護(hù)  含有緩沖鹽的流動(dòng)相不能保留在泵內(nèi)，尤其是停泵過夜或更長時(shí)間。分析結(jié)束后一定要先用純水沖洗泵，然后再換合適溶劑沖洗（一般反相鍵合固定相，可以是甲醇或者甲醇和水溶液）。 

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