辣根過(guò)氧化物酶是一種含亞鐵血紅素的蛋白質(zhì)，HRP廣泛分布于植物界，它是由無(wú)色的酶蛋白和棕色的鐵卟啉結(jié)合而成的糖蛋白，糖含量18％。HRP由多個(gè)同功酶組成，Mr在40000左右，大鼠elisa試劑盒哪家強(qiáng)，等電點(diǎn)7.2。溶于水，溶解度為5%(W/V)，溶液呈棕紅色，透明。酶催化的較適PH因供體不同而稍有差異，但多在pH5左右。酶溶于水和58％以下的酸銨溶液。HRP可溶于0.58飽和度以下的酸銨溶液，而0.62飽和度以上則不溶。該酶較適pH7.0(對(duì)愈創(chuàng)木為給體而言)。在室溫下，大鼠elisa試劑盒價(jià)格，HRP幾周內(nèi)穩(wěn)定，加熱到63℃，在15min內(nèi)穩(wěn)定。氧化還原電勢(shì)很低，pH6.08時(shí)，E 0 =-0.2070V，pH為7.71時(shí)，大鼠elisa試劑盒，E′0 =-0.2787V。HRP的輔基和酶蛋白較1大吸收光譜分別為403nm和275nm，一般以O(shè)D403nm／OD275nm的比值RZ(德文Reinheit Zahl)表示酶的純度。

? 由于辣根過(guò)氧化物酶(Horseradish Peroxidase， HRP)比活性高，穩(wěn)定，分子量小，純酶容易制備，所以較1常用。HRP廣泛分布于植物界，辣根中含量高，它是由無(wú)色的酶蛋白和棕色的鐵卟啉結(jié)合而成的糖蛋白，糖含量18％。HRP由多個(gè)同功酶組成，分子量為40，000，等電點(diǎn)為PH3～9，酶催化的較適PH因供體不同而稍有差異，但多在PH5左右。酶溶于水和58％以下飽和度酸銨溶液。HRP的輔基和酶蛋白較1大吸收光譜分別為403nm和275nm，一般以O(shè)D403nm ／OD275nm的比值RZ(德文Reinheit Zahl)表示酶的純度。高純度的酶RZ值應(yīng)在3.0左右(較1高可達(dá)3.4)。RZ值越小，非酶蛋白就越多。值得注意的是，純度并不表示酶活性，如當(dāng)酶變性后，RZ值仍可不變。* k4 |7 U# q# b% ^- t' ﹨

? ? ? HRP的催化反應(yīng)需要底物過(guò)氧1化(H2O2)和供體(DH2)。供體多為無(wú)色的還原型染料，通過(guò)反應(yīng)可生成有色的氧化型染料(D)。酶促反應(yīng)的過(guò)程如下:

做好對(duì)照正式試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)分別以陽(yáng)性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件，待檢樣品應(yīng)作一式二份，大鼠elisa試劑盒生產(chǎn)，以**實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高，說(shuō)明有非特異性反應(yīng)，可采用羊血1清、兔血1清或BSA等封閉。實(shí)驗(yàn)條件的選擇在ELISA中，進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的，其中包括:（1）　固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯1、聚本、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚本凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進(jìn)行篩選：用等量抗原包被，在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng)，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。

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