20×EvaGreen熒光染料
- 作者:上海閃晶分子生物科技有限公司 2018-08-10 15:28 1800
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20×EvaGreen熒光染料
EvaGreen 是一種用于實時定量PCR(qPCR)的DNA結合染料。該染料的諸多優點使它遠勝于SYBR Green I。除了有相似的光譜特性, EvaGreen有三個主要特點使它區別于SYBR Green I。
1.EvaGreen對PCR的抑制性遠小于SYBR Green I,因此,使用EvaGreen進行的qPCR實驗可以使用快速PCR步驟。
2.EvaGreen在實驗中可以使用較高的濃度,從而獲得遠強于SYBR Green I擴增信號;較高濃度的EvaGreen也消除了“染料重分布”的缺陷,使EvaGreen既可用于多重PCR,也可用于高分辨率(高清晰)熔解曲線分析( HRM );該分析正被越來越多的用于PCR后的基因分型和異源雙鏈分析。由于SYBR Green I 對PCR的抑制性,從而要求其使用濃度必須很低,因此SYBR Green I無法解決由低濃度造成的染料重分布問題,既不能用于多重PCR也不能用于HRM。同時,染料重分布問題也可能影響常規熔解曲線的可靠性,因為低熔點的DNA鏈可能由于這種原因而無法檢測到。
3.EvaGreen 的穩定性極好。在正常的儲存、操作和PCR過程中不會被破壞。在緩沖溶液中的染料可以安全的儲存在室溫或冰箱里,也可以反復凍融。與之相反,SYBR Green I不穩定而且降解后對PCR抑制性更強。
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RF024
100ul
200.00
EvaGreen熒光染料
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10000×SYBR Green II RNA核酸染料 800.00/100ul
產品特性:
l 極高的靈敏度
在推薦濃度下使用時可以獲得最強的 PCR 擴增信號。
l PCR抑制性極小
智能化的“按要求釋放” DNA 結合技術使得 EvaGreen 對 PCR 的抑制遠小于 SYBR Green I 。
l 和快速 PCR 兼容
對 PCR 干擾極小,從而極大的縮短了 PCR 延伸時間。
l 非常適合 HRM 分析
無“染料重分布”缺陷,兼容 PCR 后的高分辨率熔解曲線( HRM )分析。
l 兼容多重 PCR
在推薦濃度下使用時,無擴增子之間的染料遷移現象。
l 超強穩定性
在大部分生化條件下非常穩定,可在室溫下儲存并可反復凍融。
l 安全性好
細胞膜穿透性測試表明,EvaGreen幾乎不能穿透細胞膜,安全性高
l 優越的兼容性
和 SYBR GREEN I 光譜相似,和各知名品牌的 qPCR 儀器兼容。 用 EvaGreen 替代 SYBR Green 1 ,毋須改變任何您目前使用的操作步驟和儀器設備。
使用方法:
Reagent
Quantity, for 50 μl of reaction mixture
Final concentration
10X Taqbuffer(without MgCl2) 10ul 1X
25mM MgCl2 4-5ul 2.0-2.5mM
10mM dNTP 1ul 0.2mM
20ⅹEvaGreen 1.25-2.5ul 0.5X-1X
PrimerI(25pmol/ul) 1ul 0.5pmol/ul
PrimerI(25pmol/ul) 1ul 0.5pmol/ul
Taq(5U/ul) 0.4ul 2U/50ul
Template DNA variable 50 pg -1 μg
ddH2O Up to 50ul
參考文獻:
1. Mao, et al. Characterization of EvaGreen Dye and the implication of its physicochemical properties for qPCR applications. BMC Biotechnology 7, 76 (2007).
2. The Royal Society of Chemistry (2014), doi: 10.1039/c3an02334f
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